Biologia Molecular e Celular - Mestrado Acadêmico 16P5M |
Disciplina
Fundamentos Teóricos e Práticos da Biologia Molecular para Análises de Genes ( 16P5M35 ) |
Unidade
Biologia Molecular e Celular - Mestrado Acadêmico |
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Tipo
Eletiva |
Período Ideal no Curso
2 |
Conceito Mínimo para Aprovação
C |
Carga Horária
45 |
Nº de Créditos
3 |
EMENTA - Os avanços nas tecnologias de DNA surtiram um enorme impacto no campo das análises genéticas moleculares para doenças raras causadas por mutações em um único gene (monogenéticas), destinados a indivíduos sintomáticos (testes diagnósticos) ou assintomáticos (testes preditivos). O presente curso fará uma abordagem teórico-prática sobre as técnicas mais relevantes de biologia molecular para o estudo de um gene em busca de mutações ou de polimorfismos genéticos ligados a doença.
METODOLOGIA - O conteúdo teórico será em formato de aulas expositivas ou discussão de artigo. O conteúdo prático ocorrerá através do uso de ferramentas de bioinformática para a busca de genes ligados a doenças, desenho de primers, mapas de restrição e aplicação de técnicas de biologia molecular na identificação de mutações ou polimorfismos genéticos (PCR Alelo Específico, PCR-RFLP, RT-PCR Quantitativo e RT-PCR com sondas TaqMan).
CONTEÚDO PROGRAMÁTICO
I - TEORIA
- Noções sobre gene e doença genética humana, polimorfismos e mutações gênicas.
- Fundamentos teóricos das principais metodologias utilizadas em genética humana
II - PRÁTICA
- Busca do gene no Ensembl ( http://www.ensembl.org/index.html)
- Noções sobre desenho de primers (oligonucleotídeos) usando o Primer3Plus (http://www.bioinformatics.nl/cgi-bin/primer3plus/primer3plus.cgi/)
- Reações de PCR alelo específico e PCR/ RFLP convencionais; Corrida em géis de agarose e poliacrilamida ; Digestão com enzima de restrição do produto de PCR; RT-PCR quantitativo (ou Sybr Green) para identificação de mutação conhecida ; RT-PCR com sonda Taqman para estudo análise de mutações
- Consulta de base de dados de mutações na internet
- Análise e discussão sobre os resultados e as técnicas utilizadas
AVALIAÇÃO
Desenvolver uma estratégia para a análise de um gene utilizando as técnicas apresentadas no curso, isto é, o aluno deverá escrever um miniprojeto (um estudo molecular) onde descreverá a utilização de duas ou três técnicas para estudar polimorfismos, mutações ou outra característica qualquer de um gene baseado nas informações que recebeu durante o curso.
BIBLIOGRAFIA
Genética Essencial - Pimentel M, Santos-Rebouças C e Gallo C. Organização Carlos Alberto Mourão Júnior e Dimitri Marques Abramov - Guanabara Koogan
Artigos Científicos